Gram stain: πώς είναι φτιαγμένο και τι είναι

Περιεχόμενο

• Πώς γίνεται η χρώση Gram
• Σε τι χρησιμεύει

Το Gram stain, ή απλά το Gram, είναι μια γρήγορη και απλή τεχνική που στοχεύει στη διαφοροποίηση των βακτηρίων σύμφωνα με τα χαρακτηριστικά του κυτταρικού τους τοιχώματος μετά από έκθεση σε διαφορετικές βαφές και διαλύματα.

Έτσι, μέσω χρώσης Gram, είναι δυνατόν να ελεγχθεί, εκτός από το σχήμα των βακτηρίων, το χρώμα που αποκτούν και αυτό το αποτέλεσμα είναι σημαντικό για τον καθορισμό άλλων στρατηγικών για την αναγνώριση των βακτηριακών ειδών και για τον γιατρό να υποδείξει προληπτική θεραπεία σύμφωνα με τα μικροσκοπικά παρατηρούμενα χαρακτηριστικά.

Η χρώση κατά γραμμάριο γίνεται συνήθως στο εργαστήριο και αποτελεί μέρος της εξέτασης βακτηριοσκόπησης. Κατανοήστε τι είναι η βακτηριοσκόπηση και πώς γίνεται.

Πώς γίνεται η χρώση Gram

Το Gram stain είναι μια γρήγορη, πρακτική και φθηνή μέθοδος για τον εντοπισμό βακτηρίων που είναι υπεύθυνα για λοιμώξεις, καθώς είναι χρήσιμο για τους γιατρούς να υποδείξουν μια προληπτική θεραπεία για τη λοίμωξη που μπορεί να συμβεί, καθώς είναι γνωστά συγκεκριμένα χαρακτηριστικά αυτών των ομάδων βακτηρίων,

Η χρώση του γραμμαρίου γίνεται σε 7 κύρια βήματα, ωστόσο το πρωτόκολλο μπορεί να διαφέρει ανάλογα με το εργαστήριο:

1. Τοποθετήστε μερικές αποικίες του βακτηρίου στη διαφάνεια, προσθέτοντας μια σταγόνα νερό για να διευκολύνετε την ομογενοποίηση των αποικιών.
2. Αφήστε το να στεγνώσει λίγο και η λεπίδα μπορεί να περάσει γρήγορα μέσα από τη φλόγα για να ευνοηθεί η ξήρανση, ωστόσο είναι σημαντικό να δώσετε προσοχή στη θερμοκρασία, καθώς εάν η θερμοκρασία είναι πολύ υψηλή είναι πιθανό να υπάρξει αλλαγή στη δομή του βακτήρια, τα οποία μπορούν να επηρεάσουν το αποτέλεσμα της εξέτασης.
3. Όταν το πλακίδιο είναι στεγνό, καλύψτε με βαφή βιολετί κρυστάλλου και αφήστε το να δράσει για περίπου 1 λεπτό.
4. Πλύνετε τη διαφάνεια με ρεύμα τρεχούμενου νερού και καλύψτε τη διαφάνεια με το lugol, το οποίο έχει ως στόχο τη στερέωση της μπλε βαφής και αφήστε το να δράσει για 1 λεπτό. Και οι δύο τύποι βακτηρίων μπορούν να απορροφήσουν το σύμπλοκο που σχηματίζεται από τη βαφή και το lugol, γίνονται μπλε.
5. Στη συνέχεια, πλύνετε τη διαφάνεια με τρεχούμενο νερό και εφαρμόστε 95% αλκοόλ, αφήνοντάς το να δράσει για 30 δευτερόλεπτα. Το αλκοόλ είναι υπεύθυνο για τη διάλυση της λιπιδικής μεμβράνης που σχηματίζει αρνητικά κατά gram βακτηρίδια και, συνεπώς, την απομάκρυνση του συμπλόκου που σχηματίζεται μεταξύ της βαφής και του lugol, αποχρωματίζοντας αυτά τα βακτήρια. Ωστόσο, στην περίπτωση των θετικών κατά gram βακτηρίων, το αλκοόλ αφυδατώνει το κυτταρικό τοίχωμα των θετικών κατά gram βακτηρίων, προκαλώντας τους πόρους να συστέλλονται και να τα καθιστούν αδιαπέραστα.
6. Στη συνέχεια, ξεπλύνετε ξανά με τρεχούμενο νερό και καλύψτε τη διαφάνεια με τη δεύτερη βαφή, φουξίνη ή σαφραίνη και αφήστε την να δράσει για 30 δευτερόλεπτα.
7. Στη συνέχεια, πλύνετε τη διαφάνεια κάτω από τρεχούμενο νερό και αφήστε την να στεγνώσει σε θερμοκρασία δωματίου.

Μόλις στεγνώσει η αντικειμενοφόρος πλάκα, είναι δυνατόν να τοποθετήσετε μια σταγόνα λάδι εμβάπτισης και να παρατηρήσετε την αντικειμενοφόρο πλάκα κάτω από το μικροσκόπιο με στόχο 100x, ώστε να μπορείτε να ελέγξετε την παρουσία ή την απουσία βακτηρίων, καθώς και την παρουσία ζυμών και επιθηλιακών κύτταρα.

Σε τι χρησιμεύει

Η χρώση με γραμμάριο έχει τον κύριο στόχο της διαφοροποίησης των βακτηρίων σύμφωνα με τα χαρακτηριστικά του κυτταρικού τοιχώματος και της γενικής μορφολογίας. Έτσι, σύμφωνα με τα χαρακτηριστικά που παρατηρούνται στο μικροσκόπιο, τα βακτήρια μπορούν να ταξινομηθούν σε:

• Θετικά κατά Gram βακτήρια, τα οποία απεικονίζονται με μπλε χρώμα λόγω του γεγονότος ότι δεν αποχρωματίζονται από το αλκοόλ, καθώς έχουν παχύτερο κυτταρικό τοίχωμα και οι πόροι τους συσφίγγονται όταν εκτίθενται σε λουγκόλη.
• Gram-αρνητικά βακτήρια, που απεικονίζονται με ροζ / μοβ χρώμα λόγω του γεγονότος ότι αποχρωματίζονται από αλκοόλ και χρωματίζονται από σαφραΐνη ή φουξίνη.

Αφού δείτε τα βακτήρια κάτω από το μικροσκόπιο, είναι πιθανό να πραγματοποιηθούν περαιτέρω δοκιμές στο εργαστήριο για τον προσδιορισμό του είδους των βακτηρίων. Ωστόσο, μέσω του Gram και της συσχέτισης με σημεία και συμπτώματα που παρουσιάζει το άτομο, ο γιατρός μπορεί να υποδείξει προληπτική θεραπεία έως ότου είναι διαθέσιμο το αποτέλεσμα πιο συγκεκριμένων εξετάσεων, καθώς με αυτόν τον τρόπο είναι δυνατόν να μειωθεί ο ρυθμός αναπαραγωγής βακτηρίων και να αποφευχθούν επιπλοκές.